USP<788>美國(guó)藥典中對(duì)于注射劑中的顆粒物檢測(cè)規(guī)范

本總章與歐洲藥典和/或日本藥典的相應(yīng)文本一致。這些藥典已承諾不對(duì)本協(xié)調(diào)章節(jié)進(jìn)行任何單方面修改。本通用章節(jié)文本中屬于國(guó)家USP文本的部分，因此不屬于協(xié)調(diào)文本的一部分，用符號(hào)標(biāo)記(◆◆) 具體說(shuō)明這一事實(shí)。

注射劑和非注射劑中的顆粒物由溶液中意外存在的外來(lái)可移動(dòng)未溶解顆粒（氣泡除外）組成。

◆如章節(jié)<1> Injections and Implanted Drug Products中所述，通過(guò)肌肉或皮下途徑給藥的注射溶液必須滿足<788> Particulate Matter in Injections章節(jié)要求。這一要求已無(wú)限期推遲用于獸醫(yī)的產(chǎn)品。包裝和標(biāo)記的專(zhuān)門(mén)用于腸外沖洗溶液不受<788>的顆粒物質(zhì)要求的限制。放射性藥品制劑不受<788> Particulate Matter in Injections章節(jié)的限制。凡標(biāo)簽規(guī)定的在用藥前使用最終過(guò)濾器的非腸道產(chǎn)品，均可不受<788> Particulate Matter in Injections的限制，前提是有科學(xué)數(shù)據(jù)證明這一豁免是合理的。◆

對(duì)于顆粒物的測(cè)定，下文規(guī)定了兩種方法，即方法1（光阻法顆粒計(jì)數(shù)試驗(yàn)）和方法2（顯微顆粒計(jì)數(shù)試驗(yàn)）。當(dāng)檢查注射劑和腸外輸液中是否存在亞可見(jiàn)顆粒時(shí)，最好使用方法1。然而，可能有必要通過(guò)光阻法顆粒計(jì)數(shù)試驗(yàn)和顯微顆粒計(jì)數(shù)試驗(yàn)來(lái)測(cè)試某些制劑，以得出符合要求的結(jié)論。

并非所有的腸外制劑都能通過(guò)上述一種或兩種方法檢查亞可見(jiàn)顆粒。例如，如果制劑的透明度降低或粘度增加，方法1不適用時(shí)，則應(yīng)根據(jù)方法2進(jìn)行試驗(yàn)。乳劑、膠體和脂質(zhì)體制劑就是例子。類(lèi)似地，當(dāng)被吸入傳感器時(shí)產(chǎn)生空氣或氣泡的產(chǎn)品也可能需要進(jìn)行顯微顆粒計(jì)數(shù)測(cè)試。如果待測(cè)制劑的粘度足夠高，以致無(wú)法通過(guò)任何一種試驗(yàn)方法對(duì)其進(jìn)行檢查，必要時(shí)需要使用適當(dāng)?shù)南♂寗┻M(jìn)行定量稀釋?zhuān)越档驼扯?，以便進(jìn)行分析。

在檢查顆粒物的單個(gè)單元或單元組時(shí)獲得的結(jié)果不能確定地外推到其他未經(jīng)測(cè)試的單元。因此，如果要從觀測(cè)數(shù)據(jù)中得出有效的推論，以表征大量單元中顆粒物的水平，就必須制定統(tǒng)計(jì)上合理的采樣計(jì)劃。

◆就本章而言，小容量腸外注射劑是小容量注射劑的同義詞，大容量腸外注射劑是大容量注射劑的同義詞。◆

光阻法顆粒計(jì)數(shù)測(cè)試

根據(jù)光阻原理，使用合適的儀器，根據(jù)大小自動(dòng)確定顆粒大小和顆粒數(shù)量。Reagents, Indicators, and Solutions—Reagent Specifications章節(jié)中提供了無(wú)顆粒水的定義。

使用已知尺寸在10 µm到25 µm之間的球形顆粒的分散體校準(zhǔn)儀器。這些標(biāo)準(zhǔn)顆粒分散在無(wú)顆粒水中。分散過(guò)程中必須注意避免顆粒聚集。◆系統(tǒng)適用性可通過(guò)使用USP顆粒計(jì)數(shù)RS進(jìn)行驗(yàn)證。◆

一般預(yù)防措施

試驗(yàn)在限制顆粒物的條件下進(jìn)行，最好在層流柜中進(jìn)行。

使用溫?zé)岬那鍧崉┤芤鹤屑?xì)清洗所用的玻璃器皿和過(guò)濾設(shè)備（膜式過(guò)濾器除外），并用大量水沖洗，以去除所有清潔劑痕跡。使用前，用無(wú)顆粒水從上到下、從外到內(nèi)沖洗設(shè)備。

注意不要將氣泡引入待檢查的制劑中，尤其是在將制劑的部分轉(zhuǎn)移到要進(jìn)行測(cè)定的容器中這個(gè)過(guò)程中。為了檢查環(huán)境是否適合試驗(yàn)，玻璃器皿是否正確清潔，所用的水是否無(wú)顆粒，應(yīng)進(jìn)行以下試驗(yàn)。根據(jù)下述方法，測(cè)定五個(gè)無(wú)顆粒水樣品中的顆粒物，每個(gè)樣品5 mL。如果10 µm或更大粒徑的顆粒數(shù)量超過(guò)25個(gè)，則為試驗(yàn)采取的預(yù)防措施是不夠的。必須重復(fù)準(zhǔn)備步驟，直到環(huán)境、玻璃器皿和水適合試驗(yàn)。

方法

通過(guò)連續(xù)20次緩慢翻轉(zhuǎn)容器，混合樣品內(nèi)容物。如有必要，小心地拆下密封蓋。使用無(wú)顆粒水射流清潔容器開(kāi)口的外表面，并拆下封蓋，避免內(nèi)容物受到任何污染。通過(guò)適當(dāng)?shù)拇胧┫龤馀?，例如靜置2分鐘或超聲波處理。

對(duì)于大容量腸外注射劑，需要測(cè)試單個(gè)單元。對(duì)于體積小于25 mL的小容量腸外注射劑，將10個(gè)或更多單位的內(nèi)容物合并到一個(gè)清潔的容器中，以獲得25 mL的體積；可通過(guò)混合適當(dāng)數(shù)量小瓶的內(nèi)容物，并用無(wú)顆粒水稀釋至25 mL，或在無(wú)顆粒水不適用時(shí)，用適當(dāng)?shù)臒o(wú)顆粒溶劑稀釋至25 mL，制備試驗(yàn)溶液。體積為25 mL或以上的小容量非腸道藥物可單獨(dú)進(jìn)行試驗(yàn)。

非腸道使用的粉末用無(wú)顆粒水配置，或當(dāng)無(wú)顆粒水不適用時(shí)，用適當(dāng)?shù)臒o(wú)顆粒溶劑重新配制。

◆對(duì)于標(biāo)有“不用于直接輸注"的散裝包裝的非腸道用藥，當(dāng)體積為25 mL或以上時(shí)，按照小容量非腸道用藥的說(shuō)明進(jìn)行。計(jì)算與標(biāo)簽中給出的最大劑量相當(dāng)?shù)牟糠值脑囼?yàn)結(jié)果。例如，如果散裝包裝的總體積為100 mL，最大劑量體積為10 mL，則每毫升的平均粒子數(shù)將乘以10，以獲得基于10 mL最大劑量的測(cè)試結(jié)果。[注意，計(jì)算測(cè)試結(jié)果時(shí)，考慮這個(gè)最大劑量部分相當(dāng)于一個(gè)完整容器的內(nèi)容。]

應(yīng)根據(jù)容器容積的不同，按照大容量或小容量腸外制劑的指示，制備和測(cè)試包裝有雙隔室（用于容納藥品和溶劑）的產(chǎn)品。按照標(biāo)簽對(duì)每個(gè)單元進(jìn)行混合，活化和攪拌以確保單獨(dú)成分和藥物溶解*混合。◆

試樣數(shù)量必須足以提供統(tǒng)計(jì)上合理的評(píng)估。對(duì)于大容量腸外注射或體積大于等于25 mL的小容量腸外注射，可使用適當(dāng)?shù)娜佑?jì)劃，測(cè)試少于10個(gè)單位的樣品。

取四份樣品，每份5 mL，并計(jì)算尺寸等于或大于10 µm和25 µm的顆粒數(shù)。忽略第一份的結(jié)果，并計(jì)算待檢查制劑的平均顆粒數(shù)。

評(píng)估

對(duì)于在標(biāo)稱(chēng)體積超過(guò)100 mL的容器中提供的制劑，采用試驗(yàn)1.A的標(biāo)準(zhǔn)。

對(duì)于在標(biāo)稱(chēng)體積小于100 mL的容器中提供的制劑，采用試驗(yàn)1.B的標(biāo)準(zhǔn)。

對(duì)于在標(biāo)稱(chēng)體積為100 mL的容器中提供的制劑，采用試驗(yàn)1.B的標(biāo)準(zhǔn)。

[注：日本藥典中使用了試驗(yàn)1.A。]

如果平均顆粒數(shù)超過(guò)限值，則通過(guò)顯微顆粒計(jì)數(shù)測(cè)試對(duì)制劑進(jìn)行測(cè)試。

試驗(yàn)1.A

標(biāo)稱(chēng)含量超過(guò) 100 mL 的容器中的腸胃外輸注溶液或注射溶液：如果測(cè)試單位中存在的尺寸大于等于10 µm的粒子的平均顆粒數(shù)不超過(guò) 25個(gè)/mL，尺寸大于等于25 µm的粒子的平均顆粒數(shù)不超過(guò) 25個(gè)/mL，則該制劑符合測(cè)試要求。

試驗(yàn)1.B

標(biāo)稱(chēng)含量小于 100 mL 的容器的腸胃外輸注溶液或注射溶液：如果每個(gè)容器中存在的尺寸大于等于10 µm的粒子的平均顆粒數(shù)不超過(guò) 6000 個(gè)，尺寸大于等于25 µm的粒子的平均顆粒數(shù)不超過(guò)600個(gè)，則該制劑符合測(cè)試要求。

顯微計(jì)數(shù)法

使用合適的雙目顯微鏡、用于保留顆粒物的過(guò)濾器組件和用于檢查的薄膜過(guò)濾器。

將顯微鏡調(diào)整為100±10倍，并配備一個(gè)用物鏡測(cè)微計(jì)校準(zhǔn)的目鏡測(cè)微計(jì)、一個(gè)能夠容納并穿過(guò)薄膜過(guò)濾器整個(gè)過(guò)濾區(qū)域的機(jī)械工作臺(tái)，以及兩個(gè)合適的照明器，以提供除了傾斜照明之外的外場(chǎng)照明。

目鏡測(cè)微計(jì)是一個(gè)直徑為圓形的分劃器（見(jiàn)圖1），由一個(gè)被十字準(zhǔn)線分成四個(gè)象限的大圓、100倍放大時(shí)直徑為10 µm和25 µm的透明和黑色參考圓以及以10 µm增量刻度的線性刻度組成。使用經(jīng)過(guò)國(guó)內(nèi)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)機(jī)構(gòu)認(rèn)證的測(cè)微計(jì)對(duì)其進(jìn)行校準(zhǔn)。分劃的線性刻度的相對(duì)誤差在±2%以內(nèi)是可以接受的。大圓被定義為網(wǎng)格視場(chǎng)（GFOV）。

圖1。圓直徑分劃。被十字準(zhǔn)線分成四個(gè)象限的大圓被定義為網(wǎng)格視場(chǎng)（GFOV）。提供了直徑為10µm和25µm的透明和黑色圓圈，作為粒度測(cè)定的對(duì)比標(biāo)尺。

需要兩個(gè)照明器。一個(gè)是顯微鏡內(nèi)部的一個(gè)主光場(chǎng)照明器，另一個(gè)是一個(gè)外部的、可聚焦的輔助照明器，可以調(diào)節(jié)以提供10°–20°角度的反射斜照明。

用于保留顆粒物的過(guò)濾器組件包括由玻璃或其他合適材料制成的過(guò)濾器支架，并配備有真空源和合適的膜過(guò)濾器。

膜過(guò)濾器尺寸合適，顏色為黑色或深灰色，無(wú)網(wǎng)格或有網(wǎng)格，標(biāo)稱(chēng)孔徑為1.0 µm或更細(xì)。

一般預(yù)防措施

試驗(yàn)在限制顆粒物的條件下進(jìn)行，最好在層流柜中進(jìn)行。

使用溫?zé)岬那鍧崉┤芤悍浅Ｐ⌒牡厍逑此玫牟Ａ髅蠛瓦^(guò)濾器組件（膜式過(guò)濾器除外），并用大量水沖洗，以去除所有清潔劑痕跡。使用前，用無(wú)顆粒水從上到下、從外到內(nèi)沖洗膜過(guò)濾器和設(shè)備的兩側(cè)。

為了檢查環(huán)境是否適合試驗(yàn)，玻璃器皿和膜過(guò)濾器是否正確清潔，所用的水是否無(wú)顆粒，應(yīng)進(jìn)行以下試驗(yàn)。根據(jù)下述方法測(cè)定50 mL無(wú)顆粒水里的顆粒物。如果過(guò)濾區(qū)域內(nèi)存在20個(gè)以上粒徑為10 µm或更大的顆粒，或5個(gè)以上粒徑為25µm或更大的顆粒，則試驗(yàn)所采取的預(yù)防措施是不夠的。必須重復(fù)準(zhǔn)備步驟，直到環(huán)境、玻璃器皿、膜過(guò)濾器和水適合試驗(yàn)。

方法

通過(guò)將容器連續(xù)緩慢翻轉(zhuǎn)20次來(lái)混合樣品內(nèi)容物。如有必要，小心地拆下密封蓋。使用無(wú)顆粒水射流清潔容器開(kāi)口的外表面，并拆下封蓋，避免內(nèi)容物受到任何污染。

對(duì)于大容量腸外注射劑，需要測(cè)試單個(gè)單元。對(duì)于體積小于25 mL的小容量腸外注射，將10個(gè)或更多單位的內(nèi)容物組合在一個(gè)清潔的容器中；可通過(guò)混合適當(dāng)數(shù)量小瓶的內(nèi)容物，并用無(wú)顆粒水稀釋至25 mL，或在無(wú)顆粒水不適用時(shí)，用適當(dāng)?shù)臒o(wú)顆粒溶劑稀釋至25 mL，制備試驗(yàn)溶液。體積為25 mL或以上的小容量非腸道藥物可單獨(dú)進(jìn)行試驗(yàn)。

非腸道使用的粉末用無(wú)顆粒水配置，或當(dāng)無(wú)顆粒水不適用時(shí)，用適當(dāng)?shù)臒o(wú)顆粒溶劑重新配制。

試樣數(shù)量必須足以提供統(tǒng)計(jì)上合理的評(píng)估。對(duì)于大容量腸外注射或體積大于等于25 mL的小容量腸外注射劑，可使用適當(dāng)?shù)娜佑?jì)劃，測(cè)試少于10個(gè)單位的樣品。

用幾毫升無(wú)顆粒水濕潤(rùn)裝有薄膜過(guò)濾器的過(guò)濾器支架內(nèi)部。將溶液池或單個(gè)樣品的所有溶液轉(zhuǎn)移到過(guò)濾漏斗中，并施加真空。如果需要，逐步添加一部分溶液，直到整個(gè)體積被過(guò)濾。最后一次添加溶液后，使用無(wú)顆粒水射流開(kāi)始沖洗過(guò)濾器支架的內(nèi)壁。保持真空，直到膜過(guò)濾器表面沒(méi)有液體。將膜式過(guò)濾器放在有蓋培養(yǎng)皿中，讓過(guò)濾膜風(fēng)干，蓋子稍微半開(kāi)。過(guò)濾膜干燥后，將皮氏培養(yǎng)皿放在顯微鏡臺(tái)上，在照明設(shè)備的反射光下掃描過(guò)濾膜，并計(jì)算尺寸等于或大于10 µm的顆粒數(shù)量和等于或大于25 µm的顆粒數(shù)量?；蛘撸试S通過(guò)計(jì)算部分過(guò)濾膜的計(jì)數(shù)來(lái)確定整體過(guò)濾膜的計(jì)數(shù)。計(jì)算待檢查制劑的平均顆粒數(shù)。

采用圓形直徑網(wǎng)格進(jìn)行粒徑測(cè)定的過(guò)程是通過(guò)估算顆粒的等效直徑，并與網(wǎng)格上的10 µm和25 µm參考圓進(jìn)行比較。因此，粒子不會(huì)從網(wǎng)格視場(chǎng)內(nèi)的初始位置移動(dòng)，也不會(huì)疊加在參考圓上進(jìn)行比較。透明分劃參考圓的內(nèi)徑用于確定白色和透明粒子的大小，而黑色粒子的大小則使用黑色不透明分劃參考圓的外徑。

在進(jìn)行微觀顆粒計(jì)數(shù)試驗(yàn)時(shí)，不要試圖測(cè)量或列舉無(wú)定形、半液體或其他形態(tài)不明顯的材料，這些材料在過(guò)濾膜上會(huì)出現(xiàn)污漬或變色。這些材料表面很少或沒(méi)有起伏，呈現(xiàn)膠狀或薄膜狀外觀。在這種情況下，可通過(guò)光阻法計(jì)數(shù)方法測(cè)試溶液樣品來(lái)幫助解釋計(jì)數(shù)。

評(píng)估

對(duì)于在標(biāo)稱(chēng)體積大于100 mL的容器中提供的制劑，應(yīng)采用試驗(yàn)2.A的標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于在標(biāo)稱(chēng)體積小于100 mL的容器中提供的制劑，采用試驗(yàn)2.B的標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于標(biāo)稱(chēng)體積為100 mL的容器中提供的制劑，采用試驗(yàn)2.B的標(biāo)準(zhǔn)。

[注：日本藥典中使用了試驗(yàn)2.A]

試驗(yàn)2.A

標(biāo)稱(chēng)含量超過(guò) 100 mL 的容器中的腸胃外輸注溶液或注射溶液：如果測(cè)試單位中存在的尺寸大于等于10 µm的粒子的平均顆粒數(shù)不超過(guò) 12個(gè)/mL，尺寸大于等于25 µm的粒子的平均顆粒數(shù)不超過(guò)2個(gè)/mL，則該制劑符合測(cè)試要求。

試驗(yàn)2.B

標(biāo)稱(chēng)含量超過(guò) 100 mL 的容器中的腸胃外輸注溶液或注射溶液：如果測(cè)試單位中存在的尺寸大于等于10 µm的粒子的平均顆粒數(shù)不超過(guò) 3000個(gè)，尺寸大于等于25 µm的粒子的平均顆粒數(shù)不超過(guò)300個(gè)，則該制劑符合測(cè)試要求。

解決方案：

上海胤煌科技為注射劑中的不溶性微粒檢測(cè)提出了以下產(chǎn)品：

1、 YH-LEIP-0201光阻法不溶性微粒分析儀

LEIP系列不溶性微粒檢測(cè)儀滿足各國(guó)藥典中光阻法檢測(cè)不溶性微粒的儀器要求，可直接檢測(cè)注射液、無(wú)菌粉、輸液器具及藥包材的不溶性微粒含量及大小。儀器采用高性能進(jìn)口激光光源及補(bǔ)償電路，保證各種無(wú)色、有色樣品的測(cè)試精確度。進(jìn)樣狹縫及管路采用進(jìn)口316L及進(jìn)口PTFE材料，可直接檢測(cè)有機(jī)溶劑、油基質(zhì)等特殊溶液。

2、YH-MIP-0103顯微計(jì)數(shù)法不溶性微粒分析儀

技術(shù)優(yōu)勢(shì)：

√全自動(dòng)的測(cè)試系統(tǒng)，自動(dòng)掃描、計(jì)數(shù)、出具報(bào)告，減少人為操作的誤差

√全自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)，減少在使用過(guò)程中對(duì)測(cè)試人員眼睛的傷害

√可以區(qū)分顆粒性質(zhì)，鑒別不溶性微粒的來(lái)源，是金屬還是纖維

√符合中國(guó)藥典、美國(guó)藥典、歐洲藥典、日本藥典等各國(guó)藥典對(duì)于不溶性微粒檢查的要求。

3、YH-MIP-0205 Pro全自動(dòng)顯微計(jì)數(shù)法不溶性微粒分析儀

YH-MIP-0205 Pro全自動(dòng)顯微計(jì)數(shù)法不溶性微粒分析儀是全新一代的不溶性微粒分析儀，能夠以全自動(dòng)的方式實(shí)現(xiàn)樣品中的不溶性微粒檢測(cè)，可以完成自動(dòng)過(guò)濾、干燥、測(cè)試、出具報(bào)告等多項(xiàng)流程；超分辨算法、AI智能算法等多種圖像處理方式的引入，能有效確保測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。符合中國(guó)藥典、美國(guó)藥典、歐洲藥典及日本藥典等各國(guó)藥典不溶性微粒檢查的儀器要求。